TP genet

Petite question.
Dans la manip II séquençage:
comment on compte les bases du fragment ?
on prend les bases reconnues par BamHI et EcoRI dans le fragment?

Merci

Je sais qu'on est tous hyper en retard
Mais qq'un pourait répondre à ma question.
Merci

On compte les bases entre ces deux sites de restriction.
Je ne comprend pas ta question, sorry.

Tu comptes a partir de la 4 è base (comprise) du premier site de restriction jusqu'a la 3è base (comprise) du second. Tu dois arriver normalement à une longueur de 206pb si je ne me trompes pas (j'ai pas mon rapport devant les yeux).
Bon courage!

Si le site canonique est CTGCAG, et l'enzyme PstI coupe entre A et G, alors tu compte a partir de la sixième base, comprise. Puisque A restera à gauche de la coupure, et donc ne fara pas partie du fragment. La meme choses pour la EcoRI, qui coupe entre G et A.

bon, on fait quoi alors?
C marqué entre le "centre" de chacun des deux sites de restriction.
Le centre c le mileu, non?

Nous on a fait l'exercice aux TP et Christoph nous a dit comme je l'ai expliqué... Donc entre les centres des sites de restriction. Mnt ptet que la madam elle a une autre vision des choses mais ca m'étonnerait...

la mme nous a dit de determiner la séquence, rien de plus.
Mais est-ce que Mr Christophe vous a expliqué pourquoi?

Je pense k il est écrit dans le fascicule du prof qu'il faut prendre le centre des 2 sites de restriction.
Mais comme christiane complique tjs tout...!!!

ben moi qui ai fait mon stage vous eux je peux vous dire qu'ils ne sont jamais d'accord

Merci pour cette longue réponse